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患有短期健忘症的多莉（艾伦·德杰尼勒斯ElleDeGeeres配音）曾经也拥有美好的家庭，然而一连串的意外让她与和蔼可亲的父母失散。此去经年，多莉邂逅了小丑鱼父子马林（艾伯特·布鲁克斯AlbertBrooks配音）和尼莫（海登·罗兰斯HaydeRolece配音），与他们经历了前所未有的大冒险。平静的日子里，童年时期的片段记忆突然闯入多莉的脑海，于是她再度踏上寻找父母的旅程。这一次，她来到了海洋生物博物馆，遇到了不打算回到大海的章鱼汉克（艾德·奥尼尔EdO'Neill配音）以及童年
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在澳洲大堡礁的深海中，小丑鱼爸爸玛林和儿子尼莫简单幸福的生活着，可是爸爸做事常常畏首畏尾，是个胆小鬼，尼莫觉得爸爸很不勇敢，甚至有点看不起自己的爸爸。小尼莫却天不怕地不怕，跟同伴们去水面玩耍的时候，竟然被渔网捞了起来，辗转被卖到一家牙医诊所。玛林对儿子的生死未卜感到十分的担忧，就算平时不能大胆行事，为了儿子也要勇敢豁出去了。可是在路上遇到了很多艰难与恐惧，令他十分胆怯。幸好他遇到了好心的多瑞，一路与他作伴。父子俩都遇到了很多热心的帮助，最终都能重逢，玛林也从此成为儿子以及大家心中的英雄。
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心理学家诺曼突然被海军征召，派往大西洋中部，参加一个特别研究小组的工作。组里的成员包括生物学家贝思、数学家哈里和来历不明的组成巴恩斯。组成小组的目的是探究沉没在大西洋深海处的一个巨大物体，如果它是一艘外太空的飞船的话，那它在这里已经静默了三百年以上。他们驾驶装备精良的实验艇，靠近沉船进行探测，却被沉船内一不明物侵入。这个不明物体有着巨大的魔力，它能洞悉每个人的内心世界，进而控制每个人的思想和行为，让他们在与世隔绝的深海里相互猜疑、攻击，而它自己似乎正躲在一旁暗笑......
